武漢聯(lián)啟未來生物技術(shù)有限公司

膜片鉗技術(shù)本質(zhì)上也屬于電壓鉗范疇，兩者的區(qū)別關(guān)鍵在于：①膜電位固定的方法不同；②電位固定的細(xì)胞膜面積不同，進(jìn)而所研究的離子通道數(shù)目不同。電壓鉗技術(shù)主要是通過保持細(xì)胞跨膜電位不變，并迅速控制其數(shù)值，以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因此只能用來研究整個細(xì)胞膜或一大塊細(xì)胞膜上所有離子通道活動。目前電壓鉗主要用于巨大細(xì)胞的全性能電流的研究，特別在分子克隆的卵母細(xì)胞表達(dá)電流的鑒定中發(fā)揮著其他技術(shù)不...

什么是膜片鉗呢技術(shù)是當(dāng)前研究細(xì)胞膜電流及離子通道的最重要的技術(shù)。從技術(shù)層面來解釋的話，膜片鉗技術(shù)(patch clamp)是指利用鉗制電壓或者電流的方法(通常為鉗制電壓)來記錄細(xì)胞膜離子通道電活動的微電極技術(shù)。  膜片鉗技術(shù)的原理為：使用一個一頭尖一頭粗的錐狀玻璃管，管中設(shè)有微電極，管的尖端直徑約1.5~3.0μm，通過負(fù)壓吸引使尖端口與細(xì)胞膜形成千兆歐姆級的阻抗封接，尖端口內(nèi)的細(xì)胞膜區(qū)域與...

   世界唯一的采用科研級放大器的多通道全自動膜片鉗系統(tǒng)多通道全自動膜片鉗系統(tǒng)特點：1.一鍵無人值守，自動完成所有實驗操作。2.高通量，500數(shù)據(jù)點/天。3.適用于細(xì)胞系、原代細(xì)胞和肝細(xì)胞。可進(jìn)行單通道和脂雙層記錄。4.效率較高，是傳統(tǒng)膜片鉗的20-300倍。5.內(nèi)置藥物灌流系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)等。6.目前科研雜志上發(fā)表科研論文最多的多通道科研型膜片鉗。多通道全自動膜片鉗系統(tǒng)應(yīng)用領(lǐng)域：1.離子通...

 自從1976年德國馬普生物吳麗麗研究所Neher和Sakmann創(chuàng)建至今已有40年歷史。膜片鉗技術(shù)也走入自動化時代。2006年和2011年推出的科研級多通道全自動膜片鉗系統(tǒng)Patchliner和工業(yè)級高通量全自動膜片鉗系統(tǒng)SyncroPatch成為這一領(lǐng)域領(lǐng)跑者。十多年來，該款產(chǎn)品大量出現(xiàn)在Science和Nature等期刊中。1、單通道全自動膜片鉗介紹全自動膜片鉗系統(tǒng)產(chǎn)品特點：1.自動...

膜片鉗技術(shù)的應(yīng)用：Neher和Sakmann 在1976年發(fā)明了可用于檢測細(xì)胞電生理特性的膜片鉗技術(shù)。經(jīng)過四十多年的發(fā)展，膜片鉗技術(shù)在細(xì)胞電生理研究領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。　　(1)對細(xì)胞分泌的研究;　　(2)與藥物作用有關(guān)的心肌離子通道研究;　　(3)對離子通道生理與病理作用機(jī)制的研究;　　(4)對單細(xì)胞形態(tài)與功能關(guān)系的研究;　　(5)對藥物作用機(jī)制的研究;　　(6)在心血管藥理方面的研究;　...

膜片鉗技術(shù)共有四種基本記錄模式。　　(1)細(xì)胞貼附記錄模式(cell-attached recording);　　當(dāng)用微操縱器移動玻璃電極使其尖端輕壓于細(xì)胞膜后，對電極施加一個負(fù)壓力，可使細(xì)胞膜陷入玻璃電極端口，與電極內(nèi)壁形成"Ω"形封接，電極內(nèi)部和浴液之間的電阻可達(dá)1-100GΩ，此即為吉?dú)W封接，使被吸附的膜片與浴液之間隔開。封接緊密，即使撤去電極內(nèi)的負(fù)壓力，封接仍能牢固維持，這就是細(xì)胞貼...

　  (1)制備溶液-制備細(xì)胞用的電極內(nèi)液和外液;調(diào)整溶液滲透壓和pH值。　　(2)準(zhǔn)備樣本-準(zhǔn)備培養(yǎng)細(xì)胞或腦片。　　(3)拉制玻璃微電極-準(zhǔn)備記錄電極。用電極拉制儀器拉制玻璃毛細(xì)管并拋光電極尖端。　　(4)設(shè)置灌流系統(tǒng)-確保系統(tǒng)處于屏蔽狀態(tài)。　　(5)鉗制細(xì)胞-使用三維操縱器控制電極接觸細(xì)胞膜。確保細(xì)胞形成高阻封接。　　(6)信號采集和放大-放大信號。為了獲取最佳實驗結(jié)果，確保使用正確類型...

  膜片鉗技術(shù)被稱為研究離子通道的“金標(biāo)準(zhǔn)”，是研究離子通道的最重要的技術(shù)，不僅可以作為基礎(chǔ)生物醫(yī)學(xué)研究的工具，而且可以為臨床醫(yī)學(xué)研究服務(wù)。   膜片鉗技術(shù)被稱為研究離子通道的“金標(biāo)準(zhǔn)”，是研究離子通道的最重要的技術(shù)，不僅可以作為基礎(chǔ)生物醫(yī)學(xué)研究的工具，而且可以為臨床醫(yī)學(xué)研究服務(wù)。   膜片鉗技術(shù)被稱為研究離子通道的“金標(biāo)準(zhǔn)”，是研究離子通道的最重要的技術(shù)，不僅可以作為基礎(chǔ)生物醫(yī)學(xué)研究的工...

     Port-a-Patch全自動膜片鉗是新一代自動化細(xì)胞膜離子通道信息測量系統(tǒng)。該系統(tǒng)通過平板芯片電極作為記錄離子通道電流的工具，實現(xiàn)了操作簡單、高通量、灌流系統(tǒng)置換內(nèi)外液迅速、藥物消耗量少、噪聲小的優(yōu)點。Port-a-Patch全自動膜片鉗功能靈活多用，適用于各種細(xì)胞系和多種原代細(xì)胞，是科研用戶的選擇。      Port-a-patch是目前世界上zui小的膜片鉗系統(tǒng)。無論操作...

① 膜片鉗技術(shù)在通道中的研究；② 與藥物作用有關(guān)的心肌離子通道研究；③ 對離子通道生理與病理作用機(jī)制的研究；④ 對單細(xì)胞形態(tài)與功能關(guān)系的研究；⑤ 對藥物作用機(jī)制的研究；⑥ 在心血管藥理方面的研究；⑦ 創(chuàng)新藥物研究與高通量篩選的研究；⑧ 在神經(jīng)科學(xué)中的研究。

1963年，霍奇金和赫胥黎發(fā)現(xiàn)了電壓鉗技術(shù)，并獲得了諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎。1976年，德國馬克斯普朗克生物物理化學(xué)研究所Erwin Neher和Bert Sakmann首次在青蛙肌細(xì)胞上用雙電極鉗制膜電位的同時，記錄到Ach激活的單通道離子電流，從而產(chǎn)生了膜片鉗技術(shù)。1980年，美國耶魯大學(xué)醫(yī)學(xué)院F. J. Sigworth等在記錄電極內(nèi)施加5-50 cm H2O的負(fù)壓吸引，得到10-100G...

雖然傳統(tǒng)的手動膜片鉗技術(shù)是研究離子通道最經(jīng)典的，最精確的實驗方法，但其對實驗操作人員具有較高的技術(shù)要求，通量低，工作量大。隨著技術(shù)的發(fā)展，全自動膜片鉗儀器孕育而生。工作站現(xiàn)有全自動膜片鉗系統(tǒng)2套，IonWorks Barracuda和Qpatch 16X。      IonWorks Barracuda (下圖1): 具有中等通量的細(xì)胞離子通道全自動膜片鉗篩選設(shè)備 (Molecular De...

膜片鉗(patch clamp)是一種主要用于檢測細(xì)胞膜離子通道活動的電生理技術(shù)，按工作方式可區(qū)分為電壓鉗(voltage clamp)和電流鉗是最基本的工作方式，即對細(xì)胞膜電位進(jìn)行人為控制，如將膜電位鉗制于某一固定水平，或在此基礎(chǔ)上再施以階躍(step)式或斜坡式(ramp)電壓刺激，同時記錄跨膜電流，從而分析細(xì)胞膜通道的活動。電流鉗即人為控制經(jīng)微電極對細(xì)胞進(jìn)行注射的電流（等于離子通道電流...

     早期的自動膜片鉗技術(shù)的主要不足，在于很難形成真正的高阻封接。在實驗中，往往會采用高濃度的鈣離子，作為封接的促進(jìn)劑（seal enhancer）。雖然在后續(xù)的實驗操作中，高濃度的鈣離子溶液會得到洗脫，依然會對后續(xù)的實驗，產(chǎn)生較為負(fù)面的影響。在第二代以及后續(xù)開發(fā)的產(chǎn)品中，獲得真實高阻封結(jié)的能力獲得了較大的提升。同時諸如Qpatch系統(tǒng)，也成功地引入了電流鉗記錄模塊。伴隨技術(shù)的發(fā)展和迭...

      雙光子顯微鏡成像原理不同于單光子，雙光子成像需要同時用2個光子去激發(fā)熒光信號，使其躍遷到激發(fā)態(tài)，在從激發(fā)態(tài)回到穩(wěn)態(tài)過程中就會釋放能量從而發(fā)光，雙光子膜片鉗技術(shù)的優(yōu)勢在于成像分辨率很高，因為需要兩個光子在同一焦面激發(fā)熒光，所以成像時候不會產(chǎn)生很強(qiáng)的背景噪聲，故而其成像分辨率可以精確到一個spine，結(jié)合鈣信號，是可以直接記錄spine 的spike，此外，雙光子膜片鉗技術(shù)可以激發(fā)...

1、輸入動力： 基本分兩種，重力灌流和蠕動泵灌流。2、管子： 這沒什么好說的吧，盡可能少用轉(zhuǎn)接，保證良好的密封性。.3、輸出動力： 也分兩種，用真空泵吸出，或者用蠕動泵吸出。二、對灌流給藥系統(tǒng)的幾點要求：1 傳輸要穩(wěn)定：這是很重要的一個要求，傳輸忽快忽慢、甚至回吸（這個蠕動泵可能出現(xiàn)的問題），都會導(dǎo)致chamber里面液面的震動，都會導(dǎo)致你無法穩(wěn)定地鉗制細(xì)胞。（1）重力灌流和蠕動泵都有各自的...

膜片鉗灌流系統(tǒng)的構(gòu)成1、輸入動力： 基本分兩種，重力灌流和蠕動泵灌流。2、管子： 這沒什么好說的吧，盡可能少用轉(zhuǎn)接，保證良好的密封性。3、輸出動力： 也分兩種，用真空泵吸出，或者用蠕動泵吸出。二、對膜片鉗灌流系統(tǒng)的幾點要求1 傳輸要穩(wěn)定       這是很重要的一個要求，傳輸忽快忽慢、甚至回吸（這個蠕動泵可能出現(xiàn)的問題），都會導(dǎo)致chamber里面液面的震動，都會導(dǎo)致你無法穩(wěn)定地鉗制細(xì)胞。 ...

      德國馬普生物物理化學(xué)所的厄溫·內(nèi)爾與伯特·薩克曼在二十世紀(jì)七十年代末到八十年代初開發(fā)了膜片鉗技術(shù)。這一發(fā)明使得記錄單個離子通道的電流成為了可能，這幫助人們更好地理解了離子通道參與的基本細(xì)胞過程，如動作電位和神經(jīng)活動。該教授也因這項工作獲得了1991年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。       這項技術(shù)的成型，應(yīng)當(dāng)是電壓鉗技術(shù)長期以來的發(fā)展和較為成熟的玻璃微電極的問世為重要的節(jié)點。二戰(zhàn)...

腦片膜片鉗選擇海馬是中樞神經(jīng)系統(tǒng)研究中應(yīng)用較為廣泛標(biāo)本之一。其原因有以下幾點：1、海馬與腦的其它部位相對隔離，較易剝離，且剝離后受到的損傷較小；2、海馬具有高度分化的片層結(jié)構(gòu)，一方面，海馬神經(jīng)環(huán)路在片層中的分布有一定的空間規(guī)律，如錐體細(xì)胞胞體分布在錐體細(xì)胞層，而雪氏側(cè)支突觸分布于輻射層，且海馬中存在一個三突觸聯(lián)系的回路，即穿通纖維-齒狀回顆粒細(xì)胞層、苔狀纖維-CA3區(qū)錐體細(xì)胞層、雪氏側(cè)支-C...

      1966年，Yamamoto和McIlwain首次在腦片上記錄了電生理活動(1966a, b)，證實了腦組織在體外也能存活，并保持很好的活性狀態(tài)。此后，該方法在生理學(xué)研究中的應(yīng)用越來越廣泛，并為中樞神經(jīng)系統(tǒng)生理和藥理學(xué)領(lǐng)域突飛猛進(jìn)的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。1989年，Blanton將腦片膜片鉗電生理記錄與細(xì)胞的膜片鉗記錄結(jié)合起來，建立了腦片膜片鉗記錄技術(shù)，這為在細(xì)胞水平研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)...

      單探頭超低噪聲膜片鉗放大器是Axon儀器公司主要的膜片鉗放大器的新版本，整合了單通道記錄創(chuàng)新的電容反饋技術(shù)、全細(xì)胞記錄的電阻反饋技術(shù)：提供了單通道和全細(xì)胞膜片鉗優(yōu)秀的性能。通用特征包括破裂(在進(jìn)入全細(xì)胞時，使膜片破裂)雙速電流鉗(在小細(xì)胞中可以進(jìn)行較快的電流鉗);在電壓鉗中使用保持指令設(shè)置電壓指令，在電流鉗中設(shè)置電流指令;在專用的電流輸出上選擇三個增益設(shè)置中的一個(適用于膜片模...

      Axopatch200B是目前噪音低的膜片鉗放大器，它整合了電容饋和單通道記錄的探頭冷卻技術(shù)，特別適合小電導(dǎo)的單通道的記錄，是最經(jīng)典的膜片鉗放大器。單探頭超低噪聲膜片鉗放大器Axon200B主要特點1.單探頭2.探頭內(nèi)有電阻反饋與電容反饋電路，電容反饋電路的設(shè)計以及探頭具有冷卻系統(tǒng)的特點，使得熱噪聲顯著降低。3.具有超低噪聲，是目前世界上噪聲較低的膜片鉗放大器。單通道記錄時(b...

MP-285型電動顯微操作器 電動微操縱器有3種控制器（Controller），即MP-285、MP-225和MPC-200）；有2種操縱器（Manipulator Mechanical），即MP-285和MP-225）；有3種旋轉(zhuǎn)光學(xué)編碼器（Rotary Optical Encoder, ROE），即MP-285、MP-225和ROE-200。它們的不同組合構(gòu)成了如下不同型號的微操縱器，適...

      玻璃微電極是膜片鉗系統(tǒng)通過探頭直接與細(xì)胞膜封接的部件。微電極一般是用不同的玻璃毛坯管拉制而成。玻璃毛坯管從材料方面來劃分，可有兩類，即軟玻璃（如蘇打玻璃、電石玻璃）和硬玻璃（如硼硅玻璃、鋁硅玻璃、石英玻璃等）。膜片鉗系統(tǒng)電極拉制：       PP-830電極拉制儀是一種垂直式控制儀，利用金屬絲通過大電流是玻璃管加熱到熔點，利用重力拉斷。首先將玻璃軟化，拉長一個短距離（0.7-...

      本文首先介紹膜片鉗吉?dú)W封接實驗過程中需要的一些溶液配置、細(xì)胞培養(yǎng)及制備、實驗儀器及實驗材料。1試劑與溶液Dispase II為Roche公司產(chǎn)品，胎牛血清、BSA為Gibco產(chǎn)品，其他試劑均為Sigma產(chǎn)品。標(biāo)準(zhǔn)KRBB(Krebs Ringer Bicarbonate Buffer)生理溶液：NaCl 136mM、KCl 4.70mM、KH2PO4 1.20mM、NaHCO3...

      儀博生命科學(xué)儀器研發(fā)的多通道膜片鉗可實現(xiàn)中等規(guī)模的數(shù)據(jù)通量，無論在制藥業(yè)，還是在CRO、科研機(jī)構(gòu)均備受青睞。那么多通道膜片鉗有哪些特點呢？       多通道膜片鉗除了滿足藥物安全性評測和化合物篩選要求外，也適合離子通道的基礎(chǔ)研究。它同時可以最多記錄8個實驗測量，連續(xù)可以記錄48個實驗而不需用戶另外啟動程序。它所使用的NPC-16芯片整合了微灌流槽，可進(jìn)行快速精確的給藥操作。 ...

      高阻封接問題的解決不僅改善了膜片鉗電流記錄性能，還隨之出現(xiàn)了研究通道電流的多種膜片鉗方式。根據(jù)不同的研究目的，可制成不同的膜片構(gòu)型。武漢儀博生命科學(xué)儀器有限公司今天給大家分享一下四種膜片鉗記錄的形式：      (1)細(xì)胞吸附膜片(cell-attached patch)　用膜片鉗兩次拉制后經(jīng)加熱拋光的微管電極置于清潔的細(xì)胞膜表面上，形成高阻封接，在細(xì)胞膜表面隔離出一小片膜，既...

          膜片鉗技術(shù)本質(zhì)上也屬于電壓鉗范疇，兩者的區(qū)別關(guān)鍵在于：①膜電位固定的方法不同；②電位固定的細(xì)胞膜面積不同，進(jìn)而所研究的離子通道數(shù)目不同。電壓鉗技術(shù)主要是通過保持細(xì)胞跨膜電位不變，并迅速控制其數(shù)值，以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因此只能用來研究整個細(xì)胞膜或一大塊細(xì)胞膜上所有離子通道活動。       目前電壓鉗主要用于巨大細(xì)胞的全性能電流的研究，特別在分子克隆的卵母...